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·PCR
 
 





Annealing Buffer for DNA Oligos 退火緩沖液(5×)
 產品貨號: RTE3105
 產品名稱: Annealing Buffer for DNA Oligos 退火緩沖液(5×)
 產品價格/規格: 5×1ml
 產品說明書: 暫無
 更新時間: 2020-04-06
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    ●     產品組成:

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    RTE3105

    DNA退火緩沖液(5×)

    5×1ml

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    產品簡介:

    DNA寡核苷酸退火緩沖液(Annealing Buffer for DNA Oligos)簡稱為DNA退火緩沖液,是一種可用于DNA oligo退火的緩沖液,可用于常規的DNA oligo的退火,尤其適合于較難退火的用于RNAi (也稱siRNA)質粒構建的DNA oligo的退火。該緩沖液能有效避免DNA oligo自身形成發夾結構,并且兩條oligo退火后可以直接和經酶切、純化的質粒連接,轉化后可以得到大量的陽性克隆。

    本試劑操作簡單,只需把待退火的DNA oligo和退火緩沖液按照一定比例混合后,置于PCR儀上進行程序降溫,約90min即可完成。

    操作步驟(僅供參考):

    1、 把待退火的DNA oligo用經滅菌水配制成50μM,同時徹底溶解退火緩沖液(5×)備用。

    2、 按如下反應體系操作:

    順序

    組份

    體積

    1

    滅菌水

    40μl

    2

    退火緩沖液(5×)

    20μl

    3

    DNA oligo A(50μM)

    20μl

    4

    DNA oligo B(50μM)

    20μl

     

    Total

    100μl

    按照上述順序,依次加入并混勻,如果所用PCR儀沒有加熱蓋,可加入Mineral Oil防止液體揮發。

    3、 按如下PCR儀的退火條件:

    步驟

    溫度

    時間

    作用

    1

    95℃

    2min

    Oligo充分變性

    2

    90s下降1℃,降至25℃

    90min

    程序退火

    3

    -20℃

    長期保存

    暫時存放

    注:如果使用的PCR儀無梯度降溫功能,也可以95℃處理后自然冷卻至常溫。


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